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影响种子罐培养的因素主要都有哪些

 

种子罐培养过程中影响培养质量的主要因素有:营养条件、培养条件、染菌控制、扩大培养序列、接种数量等。
一、培养基
培养基与营养物质的获得密切相关,直接影响微生物的生长发育、繁殖、酶活性和产量。基质可分为C/N基质生长营养、无机盐渗透压控制、维系微量元素和调节pH酶活性的系统。
该介质要求成分简单、来源丰富、价格低廉、取料方便。
注意:种子罐的最后一级当与生产罐一致,此时前罐已建立了发酵所需的酶系,在新的环境条件下无需再构建;
种子罐培养基中应增加N的用量,而增加的无机氮含量比例较大;
细菌进级后,由于设备(罐式、搅拌方式、转速等)不同,培养基的配比需要根据试验情况重新调整。
二、种龄,接种数量。
种龄要求:对数生长期移栽,这是由于嫩种和老种在转罐后启动缓慢,造成发酵周期延长,产量低。
接种量:接种量影响新环境下的延迟时间长度,这是由于接种量与细胞分裂和增殖所需的RNA等代谢产物有关,而这种物质含量多可以迅速进入对数生长期,所以接种量与新环境下的延迟时间成反比。
三、温度
前为温度,后为溶氧。
以下是各种微生物的最佳温度范围:
微生物生长速率每升高10℃可增加一倍,温度对细胞代谢酶系有直接影响。
提高前期的温度在最适宜范围内有利于菌体的合成,而后期的溶解氧对菌体合成速率有较大的影响,此时需要提高通气量和搅拌等。
四、酸碱度影响
负离子(乙酸根、磷酸根)被吸收或利用氮源后,产生NH3,使pH升高;
正离子(NH4+,K+)被吸收或有机酸的积累降低了酸碱度;
高浓度C培养液中pH向低浓度移动;
N-型培养基中pH值升高;
三种调制pH的方法:a酸碱溶液;b缓冲液;c缓冲剂(酸或碱盐)
五、通气搅拌
通气、罐压、搅拌三个因素共同决定了目前的溶氧状况,只有当溶氧大于目前的BOD时,菌体才能正常生长,在移种期结束后,菌体进入对数生长期,分裂繁殖率指数上升,此时应调整通气量和搅拌功率,使DO达到菌体需要的标准,一旦达不到菌体需要的温度,降低菌体耗氧率,此时应调整通气量和搅拌功率,使菌体分裂生长效率降低,但又不能缺氧畸形或自溶。
六、种子罐序列确定
在不断优化调试后,应根据菌种的生长速率、对数期的菌体浓度、孢子的发育水平等特性,确定扩培级数,尽量减少扩培种子罐级数,但前提是不影响或少影响生产罐延迟期的增长和对数期的生长速率。